1、大蛇丸是被佐助杀死的。
2、在334集的时候，大蛇丸想要佐助的身体，所以佐助要动手杀他，但最后大蛇丸在自己制造的空间里侵噬了佐助，就在大蛇丸转身的时候，佐助利用自己的写轮眼，反侵噬了大蛇丸，然后把大蛇丸的力量夺了去。大蛇丸被佐助杀死之后，佐助把大蛇丸的所有都拿走了，包括他的忍术，白蛇的力量等。
具体情节如下：佐助查克拉和宇智波鼬对战的时候，查克拉用光。这个时候的大蛇丸潜藏在佐助的查克拉中，并且突然出现，接下来大蛇丸控制佐助，使用八歧之术。但是宇智波鼬有最强封印十拳剑，最后大蛇丸连同八歧大蛇被吸进酒葫芦的空间内死亡。
动漫《火影忍者》中大蛇丸死了两次，第一回是佐助杀死的（334集）、第二回被鼬杀死（358集）。在第334集剧情里，大蛇丸的真身出现啦，并且不断的袭击佐助，佐助开启了咒印的力量，将无数条小蛇一一斩杀，在佐助面前，曾经羞辱过自己的大蛇丸现在简直不堪一击。
大蛇丸曾一度因研究转生之术被发现，企图占有鼬的身体失败，这些经历迫使他不得不选择对还是雏鸟的佐助动手，结果身为雏鸟的佐助如今终于成为一只猎鹰，开始了他的复仇之路。在第358集剧情里，年幼的佐助回到从前的家中，看到父母死后残留的血迹不禁情绪崩溃，为了向鼬复仇，多年来佐助怀着憎恨的心获得了强大的力量，如今复仇的时刻终于来临了。
伴随着一阵雷鸣，鼬被佐助自创的忍术麒麟击倒，但他并没有死去，反而展现了他的必杀技须佐能乎。见识到须佐能乎的佐助已经没有多余查克拉可以应战了，就在这时，被佐助吞噬的大蛇丸再次出现了，但天不依人愿，大蛇丸刚复活就被鼬的十拳剑封印，保命用的小白蛇也被鼬的天照烧死。
1、为了暗杀佐助死的。
2、《火影忍者》是日本漫画家岸本齐史的代表作，作品于1999年开始在《周刊少年JUMP》上连载，于2014年11月10日发售的JUMP第50号完结，后日谈性质的外传漫画《火影忍者外传：第七代火影与绯色花月》则于同杂志2015年第22、23合并号开始短期连载，至同年第32号完结。
3、故事成功地将原本隐藏在黑暗中，用世界上最强大的毅力和最艰辛的努力去做最密不可宣和隐讳残酷的事情的忍者，描绘成了太阳下最值得骄傲最光明无限的职业。在岸本齐史笔下的忍者世界中，每一位年轻的忍者都在开拓着属于自己的忍道。
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